工作原理 用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗体的微孔中依次加入标本或者标准品、生物素化的抗体、HRP标记的亲和素,经过*洗涤后用底物显色。底物在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品浓度呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定OD值,计算样品浓度。
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待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等
1. 由于底物显色剂对光及其敏感,因此要避光保存。 2. 检测吸光度前应将酶标仪打开,将其预热30min以上。 3. 孵育的时间应该严格按照试剂盒说明书上的时间为准。 4. 要尽量做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。 5. 对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。
Elisa试剂盒阴性对照及阳性对照解析 Elisa试剂盒阴性对照及阳性对照:阴、阳性对照若有正确的结果,对试剂盒操作的结果可以有粗略的判断。 空白对照:对ELISA试剂来说,空白对照实际上是不加标本不加酶做对照。空白对照主要测系统的吸光率。空白对照在单波长测量时显得尤其重要