大家都知道ELISA试剂盒有很多种检测方法,每一种检测方法都有它的优势与劣势,在今天的分享内容中主要介绍直接法和间接法他们在ELISA实验时的优势与劣势!
一、直接法
将抗原直接固定在固相载体上,参加酶符号的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。
1.优势:操作手续简略,因无须运用二抗可防止交互反响。
2.缺陷:实验中的一抗都得用酶符号,但不是每种抗体都适合做符号,费用相对进步。
二、间接法
此测定办法与直接法相似,不一样在于一级抗体没有酶符号,改用酶符号的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。
1.优势:二抗能够加强信号,并且有多种挑选能做不一样的测定剖析。不加酶符号的一级抗体则能保存它zui多的免疫反响性。
2.缺陷:交互反响发作的机率较高。
被检测的抗原包被在两个抗体之间,其间一个抗体将抗原固定于固相载体上,即捕捉抗体。另一个则是检测抗体,此抗体可用酶符号后直接测定抗原的量;或不符号,再透过酶符号的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体有必要当心选择,才可防止交互反响或竞争一样的抗原部位。
1.优势:高活路,高专一性,抗原无须事前纯化。
2.缺陷:抗原必定得具有两个以上的抗体部位。
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