酶标法检测真菌毒素科研发展
真菌毒素简介:
真菌毒素是真菌在食品或饲料里生长所产生的代谢产物,对人类和动物都有害。真菌毒素造成中毒的zui早记载是11世纪欧洲的麦角中毒,这种中毒的临床症状曾在中世纪的圣像画中描述过。由于麦角菌的菌核中会形成有毒的生物碱,所以这种疾病至今仍称为麦角中毒。急性麦角中毒的症状是产生幻觉和肌肉痉挛,进而发展为四肢动脉的持续性变窄而发生坏死。
酶联免疫吸附法 enzyme linked immunosorbant assay,ELISA 简称酶标法。具体方法很多。...1加入酶联抗抗体(抗人γ球蛋白抗体),使它与已吸附的抗原和抗体的复合物相结合,再洗3次,以除去未吸附的酶联抗抗体;2加入该酶的底物,使底物分解并产生颜色,待终止反应后,依底物颜色深浅,即可知样品中的抗体含量。酶联免疫吸附试验(EIISA)具有灵敏、操作简便、样品前处理无需净化(或只需zui小限度的净化)、样品处理量大的优点,是分析真菌毒素的重要方法。超临界流体色谱法主要用于DON、T一2毒素和ZEN等镰刀菌毒素的检测;毛细管电动色谱广泛用于同时检测多种真菌毒素,其优点是样品用量少、节省提取溶剂、使用价格低廉的毛细管柱等。
酶联免疫吸附试验优点:
酶联免疫吸附试验(EIISA)是分析真菌毒素的重要方法,具有灵敏、操作简便、样品前处理无需净化(或只需zui小限度的净化)、样品处理量大的优点。
目前已建立多种分析各类农产品和食品中真菌毒素的EuSA方法。AOAC颁布了供内部机构使用的检测粮食及其他农产品中桔青霉素、圆弧偶氮酸和麦角碱的ELISA方法。上检测粮油食品中多种真菌毒素(包括AFs、AFBl、AFMl、OTA、伏马菌素、T一2毒素、DON、ZEN、桔青霉素等)商品化的ELISA试剂盒已被广泛用于实际工作中。
酶标法检测真菌毒素发展:
超临界流体色谱法(supercritical fluid chromatography)和毛细管电动色谱(capillary e,lectrokinetic chromatography)配激发光子束荧光检测(multiphotonexcited fluorescence)是分离检测真菌毒素的另外两种技术。前者主要用于DON、T一2毒素和ZEN等镰刀菌毒素的检测;后者广泛用于同时检测多种真菌毒素,其优点是样品用量少、节省提取溶剂、使用价格低廉的毛细管柱等。
逆流胶束电动色谱(reversed flow micellar eleetrokinetic chromatographv)也。用于检测玉米粗粉中的AFBl、AFB2、AFGi和AFG2。毛细管电泳法(capillarvelectrophoresis)被用于检测黑麦中的麦角碱;玉米和饲料中的伏马菌素;烘烤咖啡、玉米和高粱中的OTA等,检测限可达0.2ug/kg。
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